İn situ hibridizasyon

Hibridizasyon prosedürü sadece bir jelde, filtrelerde veya çözeltide değil, aynı zamanda histolojik veya kromozomal preparatlarda da gerçekleştirilebilir. Bu yönteme in situ hibridizasyon denir. Florokromlarla etiketlenmiş DNA veya RNA preparatlarının prob olarak kullanıldığı yöntemin bir çeşidine FISH (fluorescein in situ hibradizasyonu) denir. Etiketli DNA probu, farklı şekilde boyanmış ve hibridizasyona hazırlanmış (denatüre edilmiş) metafaz kromozomlarının preparatlarına uygulanır. Kromozomların ön işlemi, probun genomik DNA'ya erişimini kolaylaştırmak için kullanılır. Bağlanmamış DNA moleküllerini yıkadıktan ve ışığa duyarlı bir emülsiyon uyguladıktan (radyoaktif bir etiket kullanıldığında) veya uygun işlemi yaptıktan sonra (biyotin veya florescein etiketli DNA probları kullanıldığında), kullanılan DNA probuna tamamlayıcı DNA dizilerinin lokalizasyon bölgeleri, mikroskopi ile belirli kromozomların karşılık gelen bölümlerinin üzerinde karakteristik noktalar olarak doğrudan tespit edilebilir.

Bu araştırma yöntemi bize sadece kromozomal bağlantıyı değil, aynı zamanda çalışılan genin kromozom içi lokalizasyonunu da belirleme olanağı sağlıyor.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]